常用缓冲液及培养基配方
篇一:pbst中吐温20的含量
常用缓冲液及培养基配方
LB液体培养基：
Bacto-蛋白胨 酵母抽提物
10g 5g
氯化钠 10g
加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。 LB固体培养基：
每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。 SOB液体培养基
Bacto-蛋白胨
20g
酵母抽提物 5g NaCl 0.5g
加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。 SOC液体培养基
SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。 麦康凯固体培养基
每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。 NA固体培养基
牛肉浸膏
酵母浸膏 蛋白胨 蔗糖 琼脂粉
3g
1g 5g 10g 15g
加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。 TB培养基 ：
将下列组分溶解在0.9L水中： Bacto-蛋白胨 酵母抽提物
12g 24g
甘油 4ml
各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。 溶液Ⅰ
葡萄糖 2.25 g
1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml
调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。 溶液Ⅱ
10 mol/L NaOH 10% SDS 用水定容至100 ml，现配现用。 溶液Ⅲ
5 mol/L 醋酸钾
50mmol/L 20mmol/L 10mmol/L
2ml 10ml
60ml
冰醋酸 水
高压灭菌后保存。 高盐TE缓冲液
10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*
0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*
1mol/L NaCl
于室温保存（可在几年内保持稳定） CTAB抽提液
2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)
11.5ml 28.5ml
100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 * 1.4mol/L NaCl
于室温保存（可在几年内保持稳定）
CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）
在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。如果需要，可加热至65℃溶解。定容终体积至100ml. CTAB沉淀液
1%（w/v） CTAB
50mmol/L Tris.Cl, pH 8.0 10mmol/L EDTA, pH8.0 PBS缓冲液：
十二水磷酸氢二钠 磷酸二氢钾 氯化钠 氯化钾
定容至5000ml, 调pH至7.2。 ELISA包被液：
碳酸钠 碳酸氢钠
定容至1000ml，调pH至9.6。 ELISA洗涤液(0.01M PBST)：
5000ml PBS中加2.5ml吐温-20
显色液（底物溶液-邻苯二胺溶液）：
pH5.0 磷酸盐-柠檬酸缓冲液：0.1 M 柠檬酸（19.2 g/L） 24.3 ml、0.2 M Na2HPO4 (28.4 g/L) 25.7 ml、 临用时取上述溶液10 ml, 加邻苯二胺（OPD）4 mg，溶解后加入30％H2O2 15 µl；
终止液：2 M H2SO4 TE缓冲液(pH8.0)：
Tris·HCl(pH8.0)
EDTA(pH8.0) 高压灭菌。
10mmol/L 1mmol/L 1.59g 2.93g 15g 1g 40g 1g
10% SDS：
10g十二烷基硫酸钠溶于90ml水中，加热至68℃溶解，加几滴浓盐酸调pH至7.2，定容至100ml，过滤除菌。
50×TAE缓冲液 Tris 冰醋酸
0.5 mol/L EDTA(pH8.0)
用水定容至1000 ml，用时稀释50倍。 5×TBE缓冲液： Tris碱*
硼酸
0.5mol/L EDTA(pH8.0)
加水定容至1000ml，0.5×使用。 6×DNA上样缓冲液： 0.25%溴酚蓝* 0.25%二甲苯青FF* 30%甘油
甲醛凝胶加样缓冲液(DEPC处理水配制)： 50%甘油
1mmol/L EDTA(pH8.0) 0.25溴酚蓝*
0.25二甲苯青FF* 适量溴化乙锭*
242 g 57.1 ml 100 ml
54g 27.5ml 20ml
20×SSC： 氯化钠 175.3g 柠檬酸钠 88.2g 蒸馏水 900ml 溶解后用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌保存。 预杂交液： 6×SSC
5×Denhardt试剂
0.5% SDS
100ug/ml经变性并断裂成片段的鲑精DNA
5×甲醛凝胶电泳缓冲液： 0.1mol/L MOPS(pH7.0)* 40mmol/L乙酸钠
5mmol/L EDTA(pH8.0)* 甲醛变性凝胶配方：
加入0.7 g琼脂糖到49.7 ml DEPC-H2O中，用煮沸法溶解琼脂糖，待溶液冷却至55℃同时加入7 ml 10×MOPS（0.2 mol/L MOPS pH7.0, 20 m mol/L 乙酸钠，10 m mol/L EDTA pH8.0）电泳缓冲液和13.3 ml甲醛，摇匀，制板待用。 0.5 mol/L磷酸缓冲液（PH 7.2）
134 g Na2HPO4, 4 ml 85% H3PO4,用水定容至1L。 探针标记中的逆转录终止液1×TEN
40 m mol/L Tris-Cl (PH 7.5),1 m mol/L EDTA (PH 8.0),150 m mol/L NaCl。 洗膜液Ⅰ 2×SSC， 0.1％（m/V）SDS 洗膜液Ⅱ 0.1×SSC， 0.1％（m/V）SDS
SDS-PAGE 电泳分析所用的试剂：
30%丙烯酰胺： 29g丙烯酰胺和1g N ，N ’亚甲基双丙烯酰胺，加入60ml ddH2O，完全溶解后定容至100ml，过滤，置棕色瓶中备用。
Tris-甘氨酸电泳缓冲液： Tris 3.00g，甘氨酸14.4g，SDS 1g，调pH至8.3，用水定容至1L。
12%分离胶： ddH2O 3.3ml，30%丙烯酰胺4ml，Tris-HCl（pH8.8）2.5ml，10%SDS 0.1ml，10%过硫酸铵0.1ml，TEMED 0.006ml。
5%浓缩胶： ddH2O 1.4ml，30%丙烯酰胺0.33ml，Tris-HCl（pH6.6）0.25ml，10%SDS0.02ml，10%过硫酸铵0.02ml，TEMED 0.002ml。
考马斯亮蓝染色液： 乙醇450ml，冰醋酸100ml，ddH2O 450ml，考马斯亮蓝R-250 2.5g。 脱色液（1L）： 乙醇450ml，冰醋酸100ml，ddH2O 450ml。
2×上样缓冲液： 100mmol/L Tris-HCl（pH6.8），200mmol/L 二硫苏糖醇（DTT），4% SDS，0.2%溴酚蓝，20%甘油。 蛋白纯化所需的缓冲液：
Buffer B(pH 8.0)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-Cl Buffer C(pH 6.3)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-Cl Buffer D(pH 5.9)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-Cl Buffer E(pH 4.5)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-Cl 电洗脱缓冲液： SDS
Tris-Base 甘氨酸
定容至1000ml 蛋白提取缓冲液： Tris-HCl，pH6.8 SDS -疏基乙醇
0.1-0.5g
3g 18.8g
50mmol/L
4.5%
7.5%
尿素 9mol/L 电转移缓冲液：
Tris-Base 3.00g，甘氨酸14.4g，SDS 1g，甲醇 200ml，调pH至8.3，用水定容至1L。 Western blot所用试剂：
1×PBS(pH7.4)：NaCl 8 g，KCl 0.2 g，KH2PO4 0.24 g，Na2HPO4 1.44g，用蒸馏水溶解至1 L
1×PBST：5L 1×PBS 中加入2.5ml Tween-20 封闭液：100ml PBS缓冲液中加入5克脱脂奶粉
植物基本培养基溶液
大量元素（1L）
七水硫酸镁 磷酸二氢钾 硝酸钾 硝酸氨 二水氯化钙 微量元素（1L) 硼酸 一水硫酸锰 七水硫酸锌 二水钼酸钠 五水硫酸铜 六水氯化钴 碘化钾
七水硫酸亚铁 乙二铵二乙酸二钠 有机(1L) 盐酸硫胺素 盐酸吡哆辛 烟酸 肌醇 MSs培养基 10×大量 100×微量 100×铁盐 500×B5有机 6-BA 蔗糖
琼脂
调PH5.8并加水定容至1L
Msr（1L） 10×大量元素 100×微量元素 100×Fe盐 500×B5有机 蔗糖 葡萄糖
琼脂
PH5.8加水定容至1L
370mg 170mg 1900mg 1650mg 440mg
6.2mg 15.6mg 8.6mg 0.25mg 0.025mg 0.025mg 0.83mg 27.8mg 37.3mg 0.5mg 0.5mg 0.05mg 100mg 100ml 10ml 10ml 2ml 1mg 30g 0.8%
100ml 10ml 10ml 2ml 3g 7g 0.8%
IGY提纯与鉴定
篇二:pbst中吐温20的含量
试 验 抗日本血吸虫卵黄抗体的制备与鉴定
材料与方法
1.1主要试剂
正辛酸 天津市弗晨化学试剂厂 批号200101（分析纯） 硫酸铵 天津市四通化工厂（分析纯）
3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB） Amresco批号T2007/10
二甲基亚砜（DMSO） 郑州化学试剂厂 批号20030224
十二烷基磺酸（SDS） 北京鼎国生物技术公司 Sigma进口分装 L5750 丙烯酰胺 沃德赛斯生物技术有限公司Sigma进口分装A8887 羊抗鸡IgY（FITC标记） Promega公司
低分子量标准蛋白质 中科院上海生物化学研究所
DAB Amresco C069
DTT Genview DH116-2
1.2 试剂的配制
1.2.1 提取蛋白用试剂的配制
（1）饱和硫酸铵溶液
(NH4)2SO4 760g，
蒸馏水（50～80℃） 1000mL
搅拌溶解20分钟，趁热过滤冷却后以浓氨水（NH3·H2O）调PH至7.0～7.4，配制好的饱和硫酸铵置4℃处置30 min以上，瓶底应有结晶析出，用时应置室温平衡后再用。
（2）醋酸缓冲液（0.06M,pH4.8）
醋酸钠 4.082g
冰乙酸 1.815g（约1.7 mL ）
1.2.1 ELISA用试剂
（1）包被液（0.05M pH9.6 碳酸钠缓冲液）
无水Na2CO3 1.59g
NaHCO3 2.93g 蒸馏水加至1000 mL
（2）洗涤液（0.01M pH7.4 磷酸盐缓冲液）PBST
NaCL 8.0g
KCL 0.2g
KH2PO4 0.2g
Na2HPO4•12H2O 2.9gpbst中吐温20的含量。
吐温-20 0.5mL 蒸馏水加至1000 mL
（3）封闭液（1% BSA－PBST）
牛血清白蛋白（BSA） 1g
洗涤液 PBST 100mL
（4）底物缓冲液（pH5.0 柠檬酸-磷酸缓冲液）
0.1M柠檬酸 (19.2g/L) 24.3mL
0.2M Na2HPO4 (28.4g/L) 25.7mL
蒸馏水 50mL
（5）TMB底物使用液
TMB储存液（100mg溶于
10mLDMSO,4℃保存） 100µL
底物缓冲液 10mL
30%H2O2 10µL
（6）终止液（2M H2SO4）
H2SO4（96%） 22.2mL
蒸馏水 177.8mL
1.2.3 SDS-PAGE电泳用试剂
(1)10%（w/v）SDS溶液
十二烷基硫酸钠（SDS） 10g
蒸馏水 100mL
(2)10%（w/v）过硫酸铵（AP）
过硫酸铵 1g
蒸馏水 10mL （临用新鲜配制） , 4℃保存＜1周） （室温保存） （临用前新鲜配制
（3）30%丙烯酰胺混合液
丙烯酰胺 29.2g
二甲基双丙烯酰胺 0.8g 蒸馏水定容至100mL，棕色瓶4℃贮存
（4）分离胶缓冲液（1.5M pH8.8Tris-HCl）
Tris 18.2g
少量蒸馏水溶解
HCl（1M） 调pH至8.8 蒸馏水定容至100mL，4℃贮存
（5）浓缩胶缓冲液（1.0M pH6.8Tris-HCl）
Tris 12.1g
少量蒸馏水溶解
HCl（1M） 调pH至6.8 蒸馏水定容至100mL，4℃贮存
（6） 2×LeammLi样品缓冲液
10%SDS 4 mL
甘油 2 mL
1.0M pH6.8Tris-HCl 2.8 mL
（7）电极缓冲液（10×）
Tris 30.3g
甘氨酸 144.2g
十二烷基硫酸钠（SDS） 10g 蒸馏水定容至1000mL，使用时10×稀释
（8）染色液（0.25%（w/v）考马斯亮蓝R-250酸甲醇水染液）
考马斯亮蓝R-250 1.25g
甲醇 227mL
冰醋酸 46mL
蒸馏水 227mL
（9） 脱色液（酸甲醇水脱色液）
甲醇 50mL
冰醋酸 75mL
蒸馏水 875mL
1.3 耗材及主要仪器
自动双重纯水蒸馏器 上海亚荣生化器厂SZ-93型
台式电子天平 北京赛多利斯Acculab
紫外可见分光光度计 UV-2102
倒置显微镜 日本Nikon
超声裂解仪 Cole-Parmer Instrument公司
自动酶联检测仪 Anhos Labtee Instruments Gmbh公司
台式离心机 北京医用离心机厂 LD5-2A型
96孔酶标板 江苏海门公司
垂直电泳槽 北京六一仪器厂
电泳仪（DYY-5） 北京六一仪器厂
手动可调式移液枪 大龙医疗设备（上海）有限公司
荧光显微镜 日本OLYMPUS
1.4 方法
1.4.1鸡群的免疫 已做过
1.4.2 检测鸡群卵黄抗体水平的间接 ELISA方法的建立[70][71][72][73]
间接ELISA程序按常规方法在96孔聚丙乙烯微量板上进行。以日本血吸虫可溶性抗原按一定稀释倍数包被板子；0.05%的PBS-Tween20（PBST）液洗涤6次，1min每次；1%的BSA-PBST封闭，洗涤同上；加入待测卵黄液样品，37℃孵育；同上洗涤后加入酶标记兔抗鸡IgG，37℃孵育；洗涤后加入新配制的四甲基联苯胺（TMB）底物溶液，室温显色；2M的H2SO4终止反应，酶标仪上测定各孔450nm处的吸光值（OD450nm）。
1.4.5.1 抗原最适包被稀释度的确定
将抗原用包被液（0.01M，pH9.6碳酸盐缓冲液）作1:50始倍比稀释包被酶标板，采集未免前鸡蛋为阴性卵黄作1:100 1:500 1:1000 1:2000稀释，四免后第15 d收集鸡蛋为阳性卵黄作1:1000 1:2000 1:4000 1:8000稀释，加入最佳工作浓度的酶标二抗，按间接ELISA方法进行，测定各孔OD450nm值 ，方阵法确定抗原最适包被浓度和抗体的最佳稀释度。
1.4.5.2 抗原最适包被时间和温度的确定
将稀释的C.baileyi可溶性抗原以不同的方式包被，分别以4℃过夜（≥10 h），37℃孵育2h、10h后，加入阴阳性血清，按间接ELISA方法测定。
1.4.5.3 特异性试验
阻断试验：将阳性鸡抗血吸虫卵黄液作1:100～1:1600稀释，每个稀释度加入等量稀释度的血吸虫可溶性抗原，37℃孵育阻断30min后，再进行ELISA测定，同时设相应对照，比较结果。
类属反应：对3份阳性鸡贝氏隐孢子虫卵黄样品按前述方法处理后进行ELISA测定，同步设血吸虫阳性卵黄、阴性卵黄作对照。
1.4.5.4 重复性试验
选择5份鸡抗血吸虫卵黄液样品在不同时间、相同条件下重复作ELISA测定，每个样品重复3次，比较试验结果。
1.4.5.5 试验样品的检测试验
分别采集实验组和对照组4免后第15 d卵黄样品各3份，用间接ELISA方法进行效价测定。
1.5 IgY抗体的收集纯化与测定
1.5.1 IgY抗体的分离纯化
1.5.1.1 IgY抗体的粗提
取免疫后所产高效价鸡蛋清洁消毒后，打破蛋壳，弃蛋壳、蛋清及卵黄衣膜，获得卵黄液（约10ｍL/枚）与灭菌单蒸水（D.W）按1：9稀释，充分搅拌混匀，调PH值至5.1～5.4，置4℃，6h以上或过夜，滤纸过滤上清，去除最上层漂浮的卵黄脂质后，离心10min（10,000rmin-1，4℃），弃沉淀，获取上清液，即为粗提的IgY抗体。
1.5.1.2 IgY抗体的体纯
参照相关文献[66][67][68]以酸化水稀释-盐析法，用不同的盐类和浓度收集纯化卵黄中的IgY抗体。卵黄的预处理同IgY抗体的粗体，以粗体的卵黄抗体进一步以盐析法纯化。设置五种盐析法提纯IgY抗体，方法如下：pbst中吐温20的含量。
方案1：水稀释一步硫酸铵盐析法，上述卵黄预处理上清，加入33%饱和硫酸铵，搅拌均匀，4℃作用2h以上，离心（10,000rmin-1，4℃10min），弃上清，沉淀溶于原卵黄液体积的PBS（0.01M,pH7.4）中，置常规处理过的透析袋中，流水透析过夜，次日以1：1000以上的PBS搅拌透析，3h左右换液一次，透析3d，获抗体蛋白，加入1000U/ｍL的双抗，-20℃冷藏备用。
方案2：水稀释二步硫酸铵盐析法，上述预处理上清，加入50%饱和硫酸铵，搅拌均匀，
实验指导
篇三:pbst中吐温20的含量
实验十二 HBsAb检测(ELISA双抗原夹心法)
【实验目的】
1、掌握ELISA双抗原夹心法测定HBsAb的实验原理、操作步骤与结果判定。
2、熟悉酶标仪的使用
【实验原理】
将特异性HBsAg包被于固相载体上，待测标本（HBsAb）分别于固相抗原（HBsAg）、酶标抗原（HRP—HBsAg）结合形成固相抗原—抗体—酶标抗原复合物，由于反应体系中固相抗原与酶标抗原的量相对于待测抗体是过量的，因此，复合物的量与待测抗体的含量呈正比，通过酶催化底物显色反应的强度即可判断待测抗体的有无与含量。
【实验材料】
1、待测血清
2、酶标记物(HRP—HBsAg )
3、阳性、阴性对照血清
4、洗涤液（含PBS和Tween-20的缓冲液）
5、底物液A（含过氧化物的柠檬酸盐缓冲液）
6、底物液B（含溶于柠檬酸盐缓冲液中的四甲基联苯胺（TMB）
7、终止液 1MH2SO4溶液
8、酶标板（已包被HBsAg），酶标仪、微量加样器、洗板机、水浴箱或恒温箱、蒸馏水或去离子水
【实验步骤】
1、 基本步骤见图
洗涤（去除未结合物）
↓洗涤（去除未结合物 酶标抗原）
↓加终止液
双抗原夹心法测HBsAb基本步骤图
2、实验操作
（1）试剂盒，样本放置室温平衡30分钟
（2）加样 将待测血清，阳性与阴性对照血清各100µm加于已包被抗原之相应孔内，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好
（3）温育 置37℃孵育60分钟
（4）加酶标记物 小心将封板膜揭掉，除空白对照孔外，每孔加50µm酶标记物，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好
（5）温育 置37℃孵育30分钟
（6）洗涤 小心将封板膜揭掉。
手工洗板：扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20-60秒，甩干，重复5次后拍干。
洗板机洗板：使用洗板机吸干孔内液体，用洗涤液充分洗涤5次（设定每遍洗涤有20-60秒的浸泡时间）。最后一次洗完后尽量在吸水纸或干净纱布上将板拍干。
（7）显色 每孔加底物液A 、B各50µm轻轻振荡混匀，用封板膜封板后，置37℃孵育30分钟
（8）终止反应 小心将封板膜揭掉，每孔加50µm终止液终止反应，然后观察结果。
1、目测法：在白色背景上用肉眼观察，阴性对照与空白对照不显色，阳性对照孔出现明显的颜色变化，被检样本孔显色深于阴性对照孔者可判为阳性，无色为阴性。
2、酶标仪测定法
采用反应底物的最大吸收波长测定各孔吸光度值，本试验底物为TMB，最大
吸收波长为450nm 因此应在450 nm 波长用酶标仪测定吸光度值，以空白对照管调零后测各孔OD值，若样本孔OD值/阴性对照孔平均OD值≥2.1判定为阳性，否则为阴性，测定须在30分钟内完成。（阴性对照孔平均OD值若小于0.05，按0.05计算）。
【注意事项】：
1根据试剂盒，操作应严格按说明书进行。
2、避免在有挥发性物质及次氯酸类消毒剂（如84消毒液）的环境下操作。
3、加样品和液体试剂时必须用加样器加样，并定期校准。加入不同样品或不同试剂组分时，应更换加样器吸头，以避免出现交叉污染。
4、洗涤时各孔均需加满洗涤液，防止孔口有游离酶不能洗净。若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗板结束后必须立即进行下一步操作，不可使酶标板孔干燥。
5、显色是必须先加底物液A、再加底物液B；肉眼可见浅蓝色的底物液B废弃不用。
6、含H2SO4的终止液，使用时必须注意安全。一旦接触到试剂，立即用足量的水清洗。
7、测定结果须以酶标仪读数为准，用空白对照管调零，测定需在30分钟内完成 8读取结果时，应擦干酶标板底部，且孔内不能有气泡。不要触碰孔底部的外壁，指印或划痕都可能影响板孔的读数。
9、配制及盛放工作用洗涤液的容器应保持清洁并定期清洗，以防微生物污染导致假阳性反应。
10、所有样本、废液和废弃物都应按传染物处理。
11、不能使用严重溶血及含任何悬浮物的样本。
12、不同批号的特异性试剂不可混用亦不可与其他厂家试剂混用。
【方法评价】
1、方法应用 :双抗原夹心法常用于HBsAD的检测，以测定人群对乙型肝炎病毒的免疫力。
2、方法评价：双抗原夹心法是检测抗体的常用方法，此法具有敏感度高，特异性强操作简便，试剂成本低与有效期长、环保，便于自动化与标准化和适用
于大批量人群筛查等优点，是目前在国内实验室被广泛应用的一种酶免疫测定技术，缺点易产生假阳性结果。
【目标测试】
一、单项选择题
1、TMB经HRP作用后呈现蓝色，加入硫酸终止后呈现黄色，其最大吸收波长为（）
A、380nm B、420nm C450nm、D490nm、E、570nm
2、ELISA版包被后，最常用的封闭剂是：（）
A、人球蛋白B、牛球蛋白C、人白蛋白D、牛白蛋白E、磷酸盐吐温缓冲液（PBST）
3、ELISA检测方法中，HRP的底物不包括（）
A、OPD B、TMB C、4-MUG D、5-ASA E、ABTS
4、ELISA包被时通常使用的缓冲液为（）
A、pH7.4磷酸盐缓冲液B、pH7.4碳酸盐缓冲液C、pH7.4枸橼酸盐缓冲液D、pH8.6磷酸盐缓冲液E、pH9.6碳酸盐缓冲液
5、ELISA双抗原夹心法检测抗体时，固相载体包被物是（）
A、未标记的已知抗原B、未标记的已知抗体C、未标记的抗抗体 D、酶标记的抗原E、酶标记的抗体
参考答案1 C 2 D 3 C 4 E 5 A
二、思考题 分析影响结果的主要因素
专业分析完整版
篇四:pbst中吐温20的含量
版本只用作参考，各取所需
选择题
1.四分法是针对固体物料中均匀的采样方法
2.气相色谱检测器是一种测量指示载气中各分离组分及其浓度变化的装置，其中最常用的通用性检测器是①热导池检测器（TCD）——对无机物和有机物都有响应②氢火焰离子化检测器——只对有机物有响应，最常用的选择性检测器是：①火焰光度检测器（FPD）——对含P、S有机物响应，②电子捕获检测器（ECD）——反对电负性的物质有响应（S2-，H2-）
3.当用梯度PH缓冲液洗脱时，随PH由低到高，氨基酸洗脱顺序为：pbst中吐温20的含量。
酸性和小分子极性氨基酸，随后是中性和疏水性氨基酸，最后是碱性氨基酸。同种性质的氨基酸R基团疏水性弱者先流出，疏水性强者后流出。
4.蛋白酶测定时，缓冲液的不同
①PH7.5磷酸缓冲液，适用于中性蛋白酶
②PH3.0乳酸缓冲液，适用于酸性蛋白酶
③PH10.5硼酸缓冲溶液，适用于碱性蛋白酶
5.水溶性维生素稳定，常在酸性溶液中进行预处理
脂溶性维生素见光易分解，预处理：维生素→浓缩→溶于适当溶剂
6.色谱中的定量方法（归一化法、内标法）的适用范围：
归一化法：当样品组分都能流出色谱柱，可用此法进行定量计算。
7.等电点和PH的关系以及电泳方向的关系
①PH=PI，两性电解质，不带电，不迁移
②PH＜PI
③PH＞PI
8、封闭的目的、洗涤的目的？
封闭的目的：使其失去和后续步骤中其他反应试剂结合的能力。
20（PBST），洗涤要彻底，3。
9
0100C以上易变质、破坏或不易除去结合水的
可先将式样与洗净并干燥的海砂混匀，置沸水浴中，搅拌下蒸发水分后，
④对食品中糖果、乳粉、巧克力、脱水蔬菜等中的水分测定可采用化学法—卡尔费休非水滴定法。
10、消除测定过量中随机误差和系统误差的方法：
一、系统误差：①空白实验（试剂、背景的影响）、②对照实验、③仪器校正、④分析结果的校正。
二、随机误差：增加平行测定次数。
11、光谱的分类及具体方法：
光光度发、红外光谱法、原子吸收光谱法）吸收光谱（紫外可见分、磷光光度法）光谱法发射光谱（荧光光度法
散射光谱（拉曼光谱）
填空：
1、了解试剂级别
①优先纯：绿色、精密分析。
②分析纯：红色、一般分析。
③化学纯：蓝色、要求不高的一般分析。
④实验试剂：黄色、要求不高的实验工作。
2凯氏定氮吸收和滴定的颜色变化
硼酸吸收时溶液变为亮绿色，滴定时由亮绿色变为浅紫红色。
3.原子吸收的概念
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