微生物实验室意义

2020-09-06   来源:生物教案

微生物实验室
篇一:微生物实验室意义

食品微生物实验室必备设备

一,无菌室和超净工作台

是实验室的核心部分,主要为样品提供保护,保证实验结果的准确和人员的安全。

(一)无菌室

无菌室通过空气的净化和空间的消毒为微生物实验提供一个相对无菌的工作环境。无室的主要组成设备的

空气自净器,传递窗,紫外线灯等。严格的无菌室可能还装备风彬室等。

(二)超净工作台

超净工作台作为代替无菌室的一种设备,使用简单方便,为实验的开展提供一个相对无菌的操作台。超净工作台湾队根据风向分为水平式和垂直式。

二,培养箱

主要用于实验室微生物的培养,为微生物的生长提供一个适宜的环境。

(一)普通培养箱:一般控制的温度范围为:室温+5~65度,又分为电热恒温培养箱和隔水式恒温培养箱。

(二)生化培养箱:一般控制的温度范围为:5~50度。

(三)恒温恒湿箱:一般控制的温度范围为:5~50度,控制的湿度范围为:50~90%。可作为霉菌培养箱。

(四)厌氧培养箱:适用于厌氧微生物的培养。

三,干燥箱

四,灭菌器

五,天平

一般要求具备精度达到万分之一的分析天平。

六,显微镜

主要用于微生物和微小物品结构,形态等的观察。

七,分光光度计

在QS中用于生产方便面,茶饮料,肉制品,乳制品,棉白糖的企业。 八,酸度计

在QS中用于生产果蔬罐头,白沙糖,饮用水类的企业。

九,电导率仪和浊度仪

在QS中用于生产饮用水的企业。

十,折光仪

在QS中用于生产果蔬罐头,饮料类的企业。

十一,恒温水温浴锅

在QS中用于生产方便面,速冻面米食品企业。

十二,定氮装置

在QS中用于生产乳制品,含蛋白质饮料的企业。

十三,杂质度过滤机

在QS中用于生产乳品企业。

实验室配套常用设备

一,通风柜

二,离心机

三,纯水器微生物实验室意义。

四,烘箱

五,低温冰箱

实验室常用消耗品

一,玻璃器皿

二,试剂

营养琼脂,乳糖胆盐发酵培养基,乳糖发酵培养基,伊红美蓝琼脂,,,等。

浅谈药厂微生物实验室的设计与管理
篇二:微生物实验室意义

论文赏析:浅谈药厂微生物实验室的设计与管理

药品的质量控制不仅与其生产过程密切相关,同时也与实验室质量设计和管理紧密相连,特别是无菌药品生产企业将微生物实验室无菌检查的实验结果作为产品放行的重要指标,因此药品微生物质量控制显得尤为重要。药品微生物检验的对象是分布不均匀的活的生物,检验结果重现性差,为保证微生物检验结果的可靠性和检验操作人员的安全性,必须按照G (2010年修订版)和中国药典2010版《药品微生物实验室规范指导原则》要求对微生物实验室进行设计和管理,有效防止检验过程中出现因污染和交叉污染而造成的“假阳性”和“假阴性”的结果。

1 相关法规要求

中国药典2010年版《药品微生物实验室规范指导原则》中规定微生物实验室应有符合无菌检查法(附录XⅢB)和微生物限度检查法(附录x IIIC)要求的、用于具有开展无菌检查、微生物限度检查、无菌采样等检测活动的、独立设置的洁净室(区)或隔离系统,且须配备实验准备区、样品接收和贮存区、培养室、污染物处理等区域并显示标识。

GMP(2010年修订版)第六十四条规定,实验室的设计应当确保其适用于预定的用途,并能够避免混淆和交叉污染。

2 微生物实验室设计布局现状及风险

阳性对照室用于菌种的处理,因其污染严重药厂都已单设更衣室和缓冲间分室进行,而无菌检查、微生物限度检查与抗生素微生物检定的实验室未严格分开(公用更衣室及缓冲间)。在GMP检查中的2802条项中明确规定:生物检定、微生物限度检定和放射性同位素检定等应分室进行,条项解释中提到“无菌室和微生物限度室不可公用更衣室及缓冲间,防止污染无菌室”。公用更衣室及缓冲间势必会污染无菌室,微生物限度室的样品是含菌的,污染无菌室后产品可能出现假阳性的结果,抗生素具有抑菌性,污染无菌室后产品可能出现假阴性的结果,这样根本无法保证无菌检查结果的真实性,也无法就出现的超标结果进行调查,无菌检查也就失去了意义。

无菌检查室、微生物限度室、抗生素微生物检定、阳性对照实验室因送回风系统设置不合理无法调整压差,有的药厂不同实验室的回风共用一道“夹墙”,会造成实验室之间的交叉污染。对于要求无菌的环境(如无菌检查室、微生物限度检查室)应该保持相对正压,防止有菌区空气进入发生污染。对于污染源(如阳性对照室、抗生素微生物检定室)应该保持相对负压,防止污染物质的扩散对实验结果和人员安全造成影响。微生物实验室意义。

微生物检验室通常离生产区较远,且可能设置在楼层上,有的药厂在微生物检验室的洁净区内用饮用水作为清洁用水,用于人员的洗手和房间的清洁,饮用水中含有大量的细菌和不溶性

微粒,会对无菌环境造成破坏。有的药厂微生物检验室采用明管排水。

微生物检验室洁净区的内表面不平整,如照明灯、压差计未采用嵌入式安装,不易进行清洁和El常擦拭消毒。

有菌区和无菌区的洁具混用,带来交叉污染。无菌区的清洁用具没有经过灭菌处理,消毒液没有经过除菌过滤,无菌区的环境从而遭到破坏,影响实验结果。

3 微生物实验室设计要求

微生物实验室的布局、设计和建造应有利于避免交叉污染、便于清洁及日常维护,以保证高洁净度的无菌实验环境;其次,人和物是洁净区的主要污染源。因此,必须对系统的操作人员进行培训,让其充分掌握系统的运行要求,使实验用品、人带来的污染得到有效控制。在人、物流的设计和管理上,基本原则是不经过净化处理的人、不经消毒灭菌的物品不能进入无菌区域。

3.1 人流

根据GM~(2010版修订版)要求,人、物流分开。4个实验室拥有独立的更衣系统,避免交叉污染。物品集中通过洁净互锁传递窗传递,对于大容量注射剂检品量大的问题,防止频繁开启传递窗造成无菌检查室环境的破坏,物料经外清缓冲间传入无菌检查室。所有的样品经75%酒精在样品准备室擦拭后传入相应实验室,其他器具均需灭菌后传入。

美国药典规定,用于进行无菌检验的设施与用于制药的设施应该是一致的,并规定,用于无菌检验的设施不应比无菌加工生产设施造成更多的微生物污染几率。因此,合理的设计应该包括更衣区域和通过气闸。环境的监测和着装应该与药品生产中相一致。根据风险管理的原则,对于要求相对无菌环境的无菌检查室(B+A)和微生物限度检查室(c+A)基本采用嵌套式设计。

无菌检查室和微生物限度室要求检测环境无菌的,需把操作人员所用洁净服进行包裹以防止污染,无菌检查室和微生物限度室内操作人员不能超过2名。无菌服经清洗后装入呼吸袋内在双扉脉动真空灭菌柜进行灭菌,在进入无菌区时装有无菌服的呼吸袋带入。需制定SOP对更衣过程中的每一个细节进行规范,更衣的程序为:脱衣 洗手消毒-÷带手套脱鞋_÷穿无菌鞋一穿无菌内服 脱手套_带手套 穿无菌外服_÷带无菌手套。

此外,阳性对照室的洁净级别可设计为C+A,效价测定室的洁净级别可设计为D级。

3.2 物流

进入的物流与人流应严格分开,每个实验室都有单独的传递窗传递样品和实验用具,所有样品必须用75%的酒精在样品擦拭区进行擦拭,用于无菌区的实验用具必须经灭菌后才能传入,灭菌的效果应当经过验证,传递窗必须装有紫外灯进行消毒,需定期对其消毒效果进行评价以便及时更换紫外灯管。对于阳性对

照实验室可能产生的严重污染物宜通过专用的传递窗传递,并做灭活处理。各实验室的洁具单独存放,防止交叉污染。

3.3 空调系统整个系统可采用1台洁净空调,因无菌检查室和微生物限度室内的空气质量较高可经回风循环利用。为避免交叉污染,抗生素微生物检定室、阳性对照室不回风,采用全排,并采用“竖井”式回风,单阀单控,保证压差。微生物实验室意义。

无菌检查室和穿无菌外衣两个房间须达到B级要求,因其操作人员仅限于1人,发尘量较少,可参考ISPE(国际制药工程协会)将换气次数设为40~60次/h,C级区的换气次数设为20~40次/h,确定层高后便可以确定空调的额定风量,但必须考虑风量的损耗。空调系统必须全天24 h开启, 以维持正压防止污染。因故停机必须验证。

3.4 水系统

实验室通常离纯化水制水间较远,宜购买小型纯化水机用于无菌区人员洗手、卫生清洁、仪器清洗等,纯化水即制即用,并经除菌过滤后使用。饮用水含有:大量的细菌会对实验室的环境造成破坏。水的输送管线要有一定的坡度,采用步步低的方式,管道残留在设置的最低点进行排放。应设夹层放置排水管线。

3.5 洁净装修

整个实验室的洁净装修施工必须符合GB 50591—2010《洁净室施工及验收规范》的要求,其平面布局如附图所示。

4 微生物实验室管理

微生物实验室一般状况总结
篇三:微生物实验室意义

微生物实验室及设备

一、选址:

1. 实验室应选择在清洁安静的场所,远离生活区,锅炉房与交通要道;

2. 实验室应选择在光线充足,通风良好的场所,要与生产加工车间有一定距离;

3. 实验室应选择在方便选样与检验,距离车间较近的工作场所.

二、结构和布局:

根据实验实际需要,主要包括以下三大部分:细菌实验室、理化实验室、办公室.

1. 办公室 2. 理化分析实验室:(或者和细菌检验操作室合并) ①理化分析室(物理化学分析,可兼作感观检验室) ②仪器室(兼放细菌室显微镜等少量仪器) 3.细菌实验室: ①细菌检验操作室; ②无菌室(微生物的扩培、接种制细胞培养液,灭菌后培养基的分装); ③培养基制作室(培养基的配制,但灭菌后的培养基接种需在无菌室操作);

一般布局要求如下:

1. 办公室:办公室是化验人员进行原始记录等各项工作的场所,是与非化验室人员交往较多的场所,只需有桌、椅等简单设施即可.

2. 细菌检验操作室(常规操作)细菌检验操作室是细菌检验主要操作室,主要设施是实验台.实验台的要求:a.实验台面积一般不小于2.4×1.3m; b.实验台位置应在实验室中心位置,要有充足光线. c.实验台两侧安装小盆与水龙头; d.实验台中间设置试剂架,架上装有日光灯与插座; e.实验台材料要以耐热、耐酸碱为宜.

3. 无菌室:无菌室通过空气的净化和空间的消毒为微生物实验提供一个相对无菌的工作环境,无菌室是处理样品和接种培养的主要工作间,应与细菌检验操作室紧密相连.为满足无菌室无菌要求,无菌间应满足以下布局:a.入口避开走廊,设在细菌检验操作室内; b.与操作室用两道缓冲间隔开; c.无菌室与缓冲间均装有紫外灯,要求每3平米安装30w紫外灯一盏; d.无菌室内设有实验台(实验台与边台皆可),紫外灯距实验台面要小于1.5m; e.无菌室与操作室之间设有双层窗构成小通道.

4. 培养基制作室:培养基室是制作、配制微生物培养所需培养基及检验用试剂的场所,其主要设备应为边台与药品柜.

a.边台上要放置电炉,以满足熔化煮沸培养基时用; b.边台材料要耐高热、耐酸碱; c.药品柜分门别类存放一些一般药品及试剂; d.危险、易腐易燃有毒有害药品单独设保险柜存放; e.边台上要放天平,以称取药品用.

5. 洗涤消毒室:洗涤消毒室用以消毒洗涤待用与已用之玻璃器皿,培养基及污物,其面积应大于10m2(此区域的部分职能可在理化分析室完成) .

为满足洗涤消毒的功能,洗涤消毒室应设有:

a.1-2个洗涤池,洗涤池上下水网要畅通;b.器皿柜或实验台,以放置洗涤好器皿;

c.高压灭菌锅,其所用电源应满足用电负荷;d.室内安有通风装置(通风柜)或换气扇; e.有条件的单位还可在该室内,设供日常检验用水蒸馏水器装置.

6. 理化分析室(如果没有条件,这个可以和微生物常规实验室合并)理化分析室是物理化学分析的主要操作室a.实验台与细菌操作室要求相同b.设置通风柜以满足加热、消化、干燥、烧灼和化学处理等工作需要;c.洗涤池.

7. 仪器室:如果没有条件,这个可以和微生物常规实验室合并,用以放置显微镜、电子天平及理化分析用小型仪器;a.要求清洁干燥、防潮防虫、避光; b.仪器台要稳固、牢靠.

从上述资料可以总结出简单微生物实验室须具备以下几点:1.办公室即实验纪录整理和相关资料文献存放区2.常规操作区 包括(1)微生物试验结果的显微和理化检测(2)试剂、检验用仪器存放;药品需分门别类存放;危险、易腐易燃有毒有害药品单独设保险柜存放(3)培养基的一般配制;但培养基灭菌后的分装与接种必须在无菌条件下操作3.无菌操

作区 此区域为洁净区,作为微生物接种扩培和微生物发酵产物后处理工作区;超净工作台可代替无菌室,提供相对无菌的工作平台.其构造主要有电器部分、送风机、三级过滤器(初、中、高)及紫外灯等。

特别注意:高压灭菌器材设备要独处放置。

三、一般仪器设备

1. 恒温培养箱:主要用于实验室微生物的培养,一般有(1)普通培养箱:一般控制的温度范围为:室温+5~65度,又分为电热恒温培养箱和隔水式恒温培养箱.(2)生化培养箱:一般控制的温度范围为:5~50度.(3)恒温恒湿箱:一般控制的温度范围为:5~50度,控制的湿度范围为:50~90%.可作为霉菌培养箱.4)厌氧培养箱:适用于厌氧微生物的培养.可根据实际需要选用.

2. 电热恒温干燥箱:用于吸管,平皿类玻璃器皿的干热、灭菌和烘烤.

3. 高压蒸汽灭菌锅(又叫高压灭菌锅):培养基、试验用培养皿等用品的灭菌.

4. 冰箱:做暂时保藏菌种用.

5. 电子天平:一般要求具备精度达到万分之一的分析天平.

6. 显微镜:观察微生物形态的必备仪器.

7. 均质器:用于均质样品,有旋转刀片式和拍击式可以选择;例如旋转振荡器.

8.蒸馏水器:提供蒸馏水;根据现实情况,非必需.

9.水浴锅:部分培养温度需要水浴(如大肠杆菌检验)

10.超净工作台:超净工作台作为代替无菌室的一种设备,使用简单方便,为实验的开展提供一个相对无菌的操作台.超净工作台根据风向分为水平式和垂直式.

11.摇床培养机:,制备细胞培养液时,用以摇匀接种微生物、细菌和细胞等.

其它可能用到的设备:恒温水浴箱、菌落计数器、电位 pH计、高速离心机、冷冻离心机、紫外-分光光度仪等设备.

四、常规玻璃器皿

1.移液管:用于移取少量液体,常用的吸管有0.1刻度1mL及1.0刻度的10mL吸管等.

2. 培养皿:为硬质玻璃双碟,常用于分离培养,盖与底大小应合适,常用规格为90mm.

3.三角烧瓶与广口瓶:多用于盛培养基及配制溶液,常用的规格有250mL、500mL、1000mL.

4. 烧杯:供盛液或煮沸用,常用的规格为100mL、250mL、500mL、1000mL .

5. 量筒:用于液体测量,常用规格为100mL、250mL、1000mL .

6. 试管:用于菌种培养,有多种规格.

7. 载玻片盖玻片:菌种涂片观察用.

8. 微量移液管:移取微量液体,一般有1000~5000μl,100~1000μl,10~200μl,1~20μl,0.1~2μl等多种规格.

其它,如试管架、毛刷、酒精灯、接种针、接种环、牛皮纸、脱脂棉等.

五、化学试剂和培养基

参照所需购买试剂和培养基原材料以及消毒液.

浅谈药厂微生物实验室的设计与管理
篇四:微生物实验室意义

浅谈药厂微生物实验室的设计与管理

药品的质量控制不仅与其生产过程密切相关,同时也与实验室质量设计和管理紧密相连,特别是无菌药品生产企业将微生物实验室无菌检查的实验结果作为产品放行的重要指标,因此药品微生物质量控制显得尤为重要。药品微生物检验的对象是分布不均匀的活的生物,检验结果重现性差,为保证微生物检验结果的可靠性和检验操作人员的安全性,必须按照G (2010年修订版)和中国药典2010版《药品微生物实验室规范指导原则》要求对微生物实验室进行设计和管理,有效防止检验过程中出现因污染和交叉污染而造成的“假阳性”和“假阴性”的结果。

1 相关法规要求

中国药典2010年版《药品微生物实验室规范指导原则》中规定微生物实验室应有符合无菌检查法(附录XⅢB)和微生物限度检查法(附录x IIIC)要求的、用于具有开展无菌检查、微生物限度检查、无菌采样等检测活动的、独立设置的洁净室(区)或隔离系统,且须配备实验准备区、样品接收和贮存区、培养室、污染物处理等区域并显示标识。

GMP(2010年修订版)第六十四条规定,实验室的设计应当确保其适用于预定的用途,并能够避免混淆和交叉污染。

2 微生物实验室设计布局现状及风险

阳性对照室用于菌种的处理,因其污染严重药厂都已单设更衣室和缓冲间分室进行,而无菌检查、微生物限度检查与抗生素微生物检定的实验室未严格分开(公用更衣室及缓冲间)。在GMP检查中的2802条项中明确规定:生物检定、微生物限度检定和放射性同位素检定等应分室进行,条项解释中提到“无菌室和微生物限度室不可公用更衣室及缓冲间,防止污染无菌室”。公用更衣室及缓冲间势必会污染无菌室,微生物限度室的样品是含菌的,污染无菌室后产品可能出现假阳性的结果,抗生素具有抑菌性,污染无菌室后产品可能出现假阴性的结果,这样根本无法保证无菌检查结果的真实性,也无法就出现的超标结果进行调查,无菌检查也就失去了意义。

无菌检查室、微生物限度室、抗生素微生物检定、阳性对照实验室因送回风系统设置不合理无法调整压差,有的药厂不同实验室的回风共用一道“夹墙”,会造成实验室之间的交叉污染。对于要求无菌的环境(如无菌检查室、微生物限度检查室)应该保持相对正压,防止有菌区空气进入发生污染。对于污染源(如阳性对照室、抗生素微生物检定室)应该保持相对负压,防止污染物质的扩散对实验结果和人员安全造成影响。

微生物检验室通常离生产区较远,且可能设置在楼层上,有的药厂在微生物检验室的洁净区内用饮用水作为清洁用水,用于人员的洗手和房间的清洁,饮用水中含有大量的细菌和不溶性微粒,会对无菌环境造成破坏。有的药厂微生物检验室采用明管排水。

微生物检验室洁净区的内表面不平整,如照明灯、压差计未采用嵌入式安装,不易进行清洁和El常擦拭消毒。

有菌区和无菌区的洁具混用,带来交叉污染。无菌区的清洁用具没有经过灭菌处理,消毒液没有经过除菌过滤,无菌区的环境从而遭到破坏,影响实验结果。

3 微生物实验室设计要求

微生物实验室的布局、设计和建造应有利于避免交叉污染、便于清洁及日常维护,以保证高洁净度的无菌实验环境;其次,人和物是洁净区的主要污染源。因此,必须对系统的操作人员进行培训,让其充分掌握系统的运行要求,使实验用品、人带来的污染得到有效控制。在人、物流的设计和管理上,基本原则是不经过净化处理的人、不经消毒灭菌的物品不能进入无菌区域。

3.1 人流

根据GM~(2010版修订版)要求,人、物流分开。4个实验室拥有独立的更衣系统,避免交叉污染。物品集中通过洁净互锁传递窗传递,对于大容量注射剂检品量大的问题,防止频繁开启传递窗造成无菌检查室环境的破坏,物料经外清缓冲间传入无菌检查室。所有的样品经75%酒精在样品准备室擦拭后传入相应实验室,其他器具均需灭菌后传入。

微生物实验室意义。

美国药典规定,用于进行无菌检验的设施与用于制药的设施应该是一致的,并规定,用于无菌检验的设施不应比无菌加工生产设施造成更多的微生物污染几率。因此,合理的设计应该包括更衣区域和通过气闸。环境的监测和着装应该与药品生产中相一致。根据风险管理的原则,对于要求相对无菌环境的无菌检查室(B+A)和微生物限度检查室(c+A)基本采用嵌套式设计。

无菌检查室和微生物限度室要求检测环境无菌的,需把操作人员所用洁净服进行包裹以防止污染,无菌检查室和微生物限度室内操作人员不能超过2名。无菌服经清洗后装入呼吸袋内在双扉脉动真空灭菌柜进行灭菌,在进入无菌区时装有无菌服的呼吸袋带入。需制定SOP对更衣过程中的每一个细节进行规范,更衣的程序为:脱衣 洗手消毒-÷带手套脱鞋_÷穿无菌鞋一穿无菌内服 脱手套_带手套 穿无菌外服_÷带无菌手套。

此外,阳性对照室的洁净级别可设计为C+A,效价测定室的洁净级别可设计为D级。

3.2 物流

进入的物流与人流应严格分开,每个实验室都有单独的传递窗传递样品和实验用具,所有样品必须用75%的酒精在样品擦拭区进行擦拭,用于无菌区的实验用具必须经灭菌后才能传入,灭菌的效果应当经过验证,传递窗必须装有紫外灯进行消毒,需定期对其消毒效果进行评价以便及时更换紫外灯管。对于阳性对照实验室可能产生的严重污染物宜通过专用的传递窗传递,并做灭活处理。各实验室的洁具单独存放,防止交叉污染。3.3 空调系统整个系统可采用1台洁净空调,因无菌检查室和微生物限度室内的空气质量较高可经

回风循环利用。为避免交叉污染,抗生素微生物检定室、阳性对照室不回风,采用全排,并采用“竖井”式回风,单阀单控,保证压差。

无菌检查室和穿无菌外衣两个房间须达到B级要求,因其操作人员仅限于1人,发尘量较少,可参考ISPE(国际制药工程协会)将换气次数设为40~60次/h,C级区的换气次数设为20~40次/h,确定层高后便可以确定空调的额定风量,但必须考虑风量的损耗。空调系统必须全天24 h开启, 以维持正压防止污染。因故停机必须验证。

3.4 水系统

实验室通常离纯化水制水间较远,宜购买小型纯化水机用于无菌区人员洗手、卫生清洁、仪器清洗等,纯化水即制即用,并经除菌过滤后使用。饮用水含有:大量的细菌会对实验室的环境造成破坏。水的输送管线要有一定的坡度,采用步步低的方式,管道残留在设置的最低点进行排放。应设夹层放置排水管线。

3.5 洁净装修

整个实验室的洁净装修施工必须符合GB 50591—2010《洁净室施工及验收规范》的要求,其平面布局如附图所示。

4 微生物实验室管理

按照中国药典2010版《药品微生物实验室规范指导原则》要求,微生物实验人员应具备微生物学的教育背景,应经培训并授权方可上岗。在微生物实验室的入口应设置门禁装置,只允许微生物实验人员进入。还应定期对其进行无菌操作后的无菌服表面进行监测,防止人为差错。

4.2 环境监测

应定期对微生物实验室的环境进行监测, 以确保环境处于受控状态,包括沉降菌、浮游菌、尘埃粒子、设备表面监测、高效过滤器检漏,请参照相应的国家标准,设定适宜的监测频率进行环境监测。

4.3 清洁消毒

微生物实验室中无菌区域应尽量减少“阴阳角”,便于无菌室日常的擦拭消毒,无菌区所用的洁具应经灭菌处理,所用的水消毒剂应经除菌过滤。有菌区和无菌区的洁具不能共用,应在洁具颜色上加以区分。

微生物实验室意义

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